色谱法是一种基于物理化学性质差异的高效分离技术，其核心在于通过流动相与固定相的相互作用，实现混合物中各组分的精准分离。以下从分离过程、关键影响因素及固定相选择三方面解析其原理。

一、色谱分离的基本过程

1. 流动相携带混合物进入色谱柱：混合物溶解于流动相（液体或气体），流经固定相（填充于色谱柱中的特定材料）。

2. 两相间反复分配平衡：各组分与固定相发生吸附、分配等作用，因作用力强弱差异，移动速度不同。

3. 按次序流出：作用力弱的组分先流出，作用力强的被保留更久，最终实现分离。

示例：极性化合物在反相色谱中因疏水作用强，比非极性化合物更晚流出。

二、驱动分离的关键因素

1. 组分的化学性质差异

• 极性基团：羧基（酸性）、磺酸基（酸性）、酰胺基（碱性）、羰基等，决定分子极性。

• 结构特征：分子大小、手性（立体异构）、电荷分布等。

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2. 作用力类型与强度

三、固定相类型与载体选择

1. 固定相分类

• 反相色谱（非极性）：C18、C8、苯基（疏水作用主导）。

• C18反相液相色谱柱

• 正相色谱（极性）：硅胶（Si-OH）、NH2、CN（氢键与偶极作用）。

• Waters Spherisorb Amino (NH2) 色谱柱

• 离子交换色谱：SAX（强阴离子）、SCX（强阳离子）（静电作用）。

• Waters Spherisorb SAX色谱柱

• 尺寸排阻色谱：GPC（有机分子）、GFC（生物大分子）（分子筛效应）。

• Shodex GPC KF-801色谱柱

• 手性色谱：定制手性固定相（如环糊精），分离对映异构体。

• Shinwa ULTRON ES-OVM-C 硫酸氯吡格雷专用手性柱

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2. 固定相载体

• 硅胶：高比表面积，耐高压（反相/正相常用）。

• 杂化颗粒：有机-无机杂化，耐酸碱（宽pH适用）。

• 聚合物颗粒：耐腐蚀，适合生物大分子（如琼脂糖凝胶）。

• 二氧化锆：高温稳定性强，用于特殊分离场景。

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总结：色谱分离的本质

色谱法的分离效能取决于组分性质-固定相-作用力三者的匹配：

1. 极性分子可通过正相色谱分离；

2. 非极性分子适用反相色谱；

3. 带电分子依赖离子交换；

4. 大分子基于尺寸排阻效应。

   
   通过精准选择固定相与流动相，色谱法可实现对复杂样品的高分辨率、高灵敏度分离，成为分析化学的核心技术之一。