ITC等温滴定量热仪主要用于研究生物分子相互作用的完整热力学参数,包括结合常数、结合位点数、摩尔结合焓、摩尔结合熵、摩尔恒压热容和动力学参数,比如蛋白质与核酸作用。ITC的应用范围各种生物分子的相互作用;酶促反应动力学;蛋白质折叠/去折叠;RNA折叠。
ITC等温滴定量热仪仪器的特点和用途:
等温滴定微量热仪系统直接测量生物化学结合过程中释放或吸收的热量,然后计算出结合亲和力、化学计量、焓和熵。样品制备和系统优化工作量最少,数据生成快速、方便。等温滴定微量热仪仅需少量样品即可进行各种研究,包括表征小分子、蛋白质、抗体、核酸、脂类和其他生物分子的分子间相互作用,也可用于测量酶动力学。
ITC检测方式与化学反应中的酸碱滴定法相似,在ITC测定中,首先将一种反应物置于一个温控样品池中,并通过一个热电偶回路与一个参比池相偶联,样品池和参比池处于相同的外部环境。特定的滴定剂(按实验需要选择)定量滴加到样品池中,当样品与滴定剂发生反应时,样品池和参比池的温度会发生变化,反应变化的能量可以被ITC检测仪灵敏地检测出来,并通过正反馈或负反馈触发恒温装置保持温度恒定。
如果要进行分子间相互作用的研究,如研究蛋白质与蛋白质的相互作用、蛋白质与糖相互作用、药物与蛋白质相互作用、小分子物质与蛋白质间相互作用、酶促反应动力学分析、核酸与核酸相互作用、核酸与小分子相互作用等,可以考虑运用等温滴定量热技术进行检测。
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