艰难梭菌（ Clostridium difficile ，CD）是一种产毒素的专性厌氧革兰阳性芽孢菌，广泛分布于人和动物的肠道及环境中 。 因其对氧极为敏感，在传统培养基上分离培养较困难，故命名为艰难梭菌。

在过去的十年里，艰难梭菌感染的频率和严重程度在世界范围内不断增加，成为 引起抗生素相关性腹泻和院内感染的主要病原菌之一 。2013年和 2019 年美国 CDC 《抗生素耐药威胁报告》将艰难拟梭菌列为紧急威胁的耐药菌 。

艰难梭菌感染的危险因素：

·抗生素使用(2-3月使用以上)

·住院(2-3个月长期住院)

· 高龄 ( ＞ 65岁 )

·鼻饲管和胃肠道治疗

· 胃酸抑制药物 - 质子泵抑制剂和组胺2(H2)受体拮抗剂

·免疫抑制状态

·炎症性肠病

·胃肠道手术

近年来，我国部分地区已检测出高毒力株，表明艰难梭菌感染( Clostridium difficile infection, CDI)已对我国临床构成了威胁。同时，研究表明我国的 CDI 分子流行病学特征具有自身特点 ， 使得CDI的防控形势十分严峻。因此，临床快速、准确诊断 CDI ， 对改善患者预后及节省我国医疗支出具有重要意义。

2017年我国发布了《中国成人艰难梭菌感染诊断和治疗专家共识》，将艰难梭菌感染诊断标准更新为：患者出现中至重度腹泻或肠梗阻，并满足以下任一条件：（1）粪便检测CD毒素或产毒型CD结果阳性；（2）内镜下或组织病理检查显示伪膜性肠炎。

目前，艰难梭菌的检测方法可分为实验室检测和临床诊断策略。实验室检测主要为菌株检测、毒素的核酸检测和毒性检测。

菌株检测中，厌氧培养法费用较低、操作简单，但仍需生物化学反应鉴定且无法判定是否为产毒株，因此后续可通过PCR法或MALDI-TOF MS两种技术对典型的艰难梭菌菌落进行鉴定。

2019年发布的《MALDI - TOF MS在临床微生物鉴定中的标准化操作专家共识》为临床微生物的高效鉴定提供了规范性指导。目前，国内已有实验室使用MALDI-TOF MS技术对经培养法获得的艰难梭菌疑似菌株进行准确鉴定，提升了临床实验室鉴定艰难梭菌的水平及效率。

虽然目前艰难梭菌的检测方法有多种，但粪便培养仍然是艰难梭菌检测的金标准。在得到纯培养的菌株后，后续还对培养后的菌株进行毒素分型、分子分型，并检测其耐药性，方便临床根据耐药性结果给患者对症下药，减少抗生素滥用风险。除此之外，还能够研究其传播能力（如芽孢形成、黏附能力等）与传播进化机制，预防疾病的传播。

《艰难梭菌感染诊断（T/CPMA 008-2020）》

在艰难梭菌粪便培养培养时，需要先使用无水乙醇对粪便进行前处理，然后使用特殊的培养基CCFA或CDMN，严格厌氧培养48-72h。

传统培养方法：采用厌氧产气袋培养。但由于产气袋生成厌氧环境时间较长（40分钟以上），细菌暴露在有氧环境中的时间较长，导致艰难梭菌检出率偏低。

最新培养方案：如今用户可选择采用智能厌氧微生物培养系统，实现更加严格的厌氧培养环境。例如，浙江省疾病预防控制中心，配合采用了DW-100A-K智能厌氧微生物培养系统，厌氧环境的生成时间大幅缩短，避免样本长时间暴露在有氧环境中，且生成气体环境严格，大大提高了艰难梭菌检出率。

DW-100A-K系列 智能厌氧微生物培养系统

仪器服务于各类厌氧菌微需氧菌和嗜二氧化碳菌的培养、检验，可根据需要选择特定氧气浓度（0%-15%可选）和 CO ₂ 浓度（5%-15%可选） 。仪器 能快速生成环境，微需氧最快约2 min，厌氧最快约 4 min，仪器稳定可靠，确保重现性 100% 。

设备自带 五级自检质控（气体输入气压检测、罐体连接性检测、罐体泄漏性检测、罐体密封性检测、催化剂活性检测）， 确保培养罐气密性，严格保障厌氧环境 。

产品优势：

1、一机多用：厌氧、微需氧和嗜CO ₂ 培养；

2、快速生成环境：微需氧、CO ₂ 最快2 min，厌氧最快 4 min；

3、脱机培养：培养罐可从仪器上卸载、独立控制，设置不同培养环境，培养过程密封，避免样本泄漏；

4、罐体灵活配置：多种罐体可选，满足不同培养需求；

5、QA质控软件：培养前 5 级质控检测，确保重现性 100% 。