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技术讲解:ELISA试剂盒标准曲线相关问题及解答

2016-7-13  阅读(5371)

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                技术讲解:ELISA试剂盒标准曲线相关问题及解答  

 

               

 
     实验中,很多因素都能影响标准曲线的结果,其中就包括配制和操作。让我们一起来看看吧!
我是否可以改变标准品的配制?
◆ 不可以。用的稀释液适当稀释的重组标准品如说明书中所示。
◆ 混合和溶解标准品时,应避免起泡。
◆ 溶解后的标准品静置至少15分钟(根据说明书)。在使用之前轻轻混匀,保证所有的固体已经溶解。
◆ 制作标准曲线时,确保所有的稀释步骤已经准确完成。稀释时注意及时更换枪头。在移液之前将稀释液充分混合。
elisa试剂盒洗涤方式怎样影响我的标准曲线?
◆ 不*的洗涤会降低测定性,导致不理想的标准曲线结果。确保洗板机的正常工作,确保酶标板各孔被充分洗涤却不干燥。
移液方式怎样影响我的标准曲线?
◆ 不合理的移液操作会导致高CV值和不理想曲线。
◆ 在制作标准曲线的过程中,不正确的移液方式会导致错误的稀释,从而使错误的数值进入标准曲线中,或者产生非线性曲线。确保移液器正常工作。每孔中的液体体积不等可能就是移液器失灵或者枪头使用不当所致。
ELISA试剂盒测定多个酶标板时是否可以使用同一条标准曲线?
◆ 在测定不同板中的样品时,每一个板都对应一条标准曲线。技术错误或者不同的孵育情况,环境条件都会引起酶标板之间产生不同结果。一条标准曲线测定的样品值必需是在相同环境下产生的,否则就是无效值。

 

 

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