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核酸染料要怎么用？用的时候要注意些什么？
2020-12-15 阅读(13415)
核酸染料的机理是通过静电吸附与DNA分子结合，从而大大增加了DNA的发光。它的荧光信号强，背景低，不同于强效EB，毒性较低，使用更安全。双链DNA在透射的紫外线下显示绿色荧光，可用于RNA染色。激发波长分别为268m，294mm和491nm，前两种是紫外光，后者是可见光。发射波长在530nm处产生。
核酸染料的使用方法：
1、在微波炉中融化100m琼脂凝胶溶液（浓度通常为0.8％〜2）。
2、加入2-5ul，并轻轻摇动以免产生气泡。
3、冷却至不烫手时倒入凝胶，琼脂糖凝胶*固化后，加载样品进行电泳。
4、电泳完成后，使用可疑的凝胶成像系统或可见光透射仪进行观察。如果您使用可疑的凝胶成像系统拍照，则可以通过调节照明设备，曝光时间并选择合适的光片来获得清晰的图像和低背景的照片。
核酸染料的注意事项：
1、胶水的厚度不应超过0.5cm，胶水太厚会影响检测的灵敏度。
2、琼脂凝胶的反复融化可能会影响核酸检测的灵敏度。
3、当通过凝胶电泳回收DNA时，建议在自然光下进行染色和切割DNA谱带，以避免紫外线和EB对目标DNA的损害，这可以显着改善分子生物学的下游水平，例如作为克隆，转化和转录。
4、对皮肤和眼睛有一定刺激性。操作时请戴手套。如果不小心触摸皮肤，则应立即清洗并正确处理废物。
