“八连排一打开就飞溅,样本全洒了!”
“盖子盖不稳,P出来时已挥发......"
想要 PCR 一次做成,避免 PCR 管带来的「尴尬情况」?首先要学会 PCR 管的选用,一款「高清、稳定、有数字、体积合适」的 PCR 管真的可以带你逃离社死现场。本文整理 3 个 tube 选择维度,带你挑选适合的那个。
根据样本数量,选择 3 种 tube
01 少量样本如何选管?
首先可以考虑实验通量,根据样品数量选择耗材。少量样品的实验可以选择 PCR 单管、八联管或十二联管,减少耗材的消耗。
>>>PCR 单管: 独立管+独立盖子的组合,相对于 PCR 联管和 PCR 板更能确保样品的独立性,避免样品之间发生交叉污染,适合在样品量非常少的时候使用。
>>>PCR 联管: 常见的 PCR 联管有八联管和十二联管,在处理样品数量稍多一些的实验时,比 PCR 单管更具有操作的便捷性。出于避免样品污染或者方便 PCR 产物回收的考虑,可以选择每一个管子带独立盖子的 PCR 联管。
02 大量样本可选「孔板」
如果样品数量多,那么为了方便批量操作,可以根据样品数量挑选 24 孔、48 孔、96 孔或 384 孔的 PCR 板。在挑选 PCR 板的时候,需要额外考虑 PCR 板的切角和裙边设计。有了这两个「助手」,加样顺序就能一目了然,避免眼花缭乱。
>>>切角:一般用 PCR 板的数字字母组合定位,PCR 板上 8 个行常用大写英文字母表示,12 个列则用阿拉伯数字表示。故而切角位置在 A12 代表 96 孔 PCR 板的右上角位置有倒角设计。
>>>裙边:是在 PCR 孔口所在平面的基础上向上或向下延伸的垂直边缘。没有垂直边缘就是无裙边,垂直边缘向上延伸称为升裙边,垂直边缘向下延伸又可以分为两种情况——边缘向下延伸到底的称为全裙边,边缘向下延伸但不到板底的称为半裙边。
根据反应体系,选 tube 容量
其次,可以考虑反应体系大小进行选择。各类 PCR 耗材还有常规容量和低容量之分,对于样品珍贵稀少,或者所需反应体系较小的 PCR 实验可以用低容量的 PCR 耗材来降低样品和试剂的用量。
根据目的,选「凸盖」或「联盖」
还可以从实验目的出发考虑。普通 PCR 实验选择凸盖的 PCR 管或联盖,更有利于保持 PCR 耗材在实验过程中的形状稳定性,防止管口和孔口在经历剧烈温度变化时因为形变而导致样品蒸发。
qPCR 实验则一定需要选择平盖的 PCR 管或联盖以确保荧光透过率,必要时也可以选择用高透明度的封板膜进行批量密封。最后,白色孔的 PCR 耗材能够在更短时间内完成 qPCR 的荧光定量。
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帮你更好地定位样本
PCR 实验已经是生物实验室的基础实验之一,小伙伴们日复一日配制的 PCR 体系充满了枯燥又辛苦的重复劳动。
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