13
免疫亲和柱的特点及条件优化要怎么做
时间：2022-5-9
阅读：2480
免疫亲和柱基于抗原抗体反应，特异性抗体连接在柱体内，选择性吸附样品中的待检物，杂质不被吸附，流出柱外，柱上结合的目标物再被特定的洗脱液洗下来，可以用于液相色谱分析或者ELISA含量测定，是一种高效的前处理柱。
免疫亲和柱的特点：
1、采用单克隆免疫技术，可以有效性地将待测成分分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。
2、实验稳定性好，重复性强。
3、纯化过程简单快速，短时间即可处理大量样品。
4、实验设备轻便，自动化程度高，操作简单，对实验人员要求不高，可在小型试验场所使用。
5、无需有毒溶剂，实验过程安全可靠。
6、应用范围广，可处理多种复杂样品。
免疫亲和柱的条件优化要怎么做：
选择小柱：根据基质样品和目标物选择合适的SP小柱。
活化平衡：活化溶液可以湿润填料，渗透键合相，消除填料杂质，通常和洗脱液一致平衡溶液一般和上样液接近，从活化溶液过度到上样液，减少上样回收率损失。
上样：将提取溶液加入到小柱上，一般需控制流速在1-2滴/秒。
淋洗：使用与上样溶液相同或接近性质的溶液冲洗不需要的杂质。
洗脱：合适的洗脱溶剂将目标物洗脱下来。
小贴士：
真菌毒素危害极大，应戴手套操作。
不要使用过了有效日期的。
洗脱液可以直接使用色谱级甲醇洗脱，但可能会降低回收率。
多毒素检测中，呕吐毒素因为是水溶性，过柱操作时对有机溶剂耐受性低，所以组合中包含有呕吐毒素的前处理方法会相应复杂一些，前处理方法基本一致。