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C8反相液相色谱柱的构成及平衡、再生和维护
时间：2021-9-26
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C8反相液相色谱柱主要由不锈钢制成。
现在流行两种主要的液相色谱柱的式样，关键部件卡套有些不同。
一种式样是螺母、卡套全套在柱管上，分配器和烧结过滤板按顺序放在尾部接头内。拧紧螺母和尾部接头，卡套一次成型紧紧咬住柱管外壁，起到很好的密封作用。分配器使得高压流动相不集中在一点冲击柱床，又能把由流动相带来的样品分散到柱头上均匀分离，形成对称的色谱峰。烧结过滤板的孔径＜5微米，除了能缓和高压流动相对固定相的冲击，也挡住了污染物进入色谱柱柱头。
C8反相液相色谱柱的维护：
1.色谱柱的平衡
反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。
2.色谱柱的再生
长期使用的色谱柱，往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对色谱柱进行再生，在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。建议用来冲洗柱子的溶剂体积。
3.色谱柱的维护
a.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
b.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围
c.避免流动相组成及极性的剧烈变化
d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存于甲醇或乙腈中
f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。