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时间:2010/2/21阅读:4402
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抗体稀释液和ELISA相关溶液的配制

窗体顶端

1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
  

 NaH2PO4·2H2O

0.39

Na2HPO4

1.27

NaCl

0.85

NaN3

200mg

H2O(蒸馏水)

至    1000ml

2ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液PH7.4PBST 

NaCl

2.0

KH2PO4

0.2

Na2HPO4·12H2O

2.9

KCl

0.2

NaN3

0.2

H2O

至    1000ml

吐温(Tween20

0.5ml

  4°C保存备用

3、包被液(简称CBpH9.6  

Na2CO3

1.59

NaHCO3

2.93

NaN3

0.2

H2O

至    1000ml

  密封盖好,4°C存放备用

4ELISA底物液(可溶性底物)
  

磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.0

 

0.1mol/L柠檬酸(21.014/100ml)

24.3ml

0.2mol/L Na2 HPO428.4/1000ml)

25.7ml

H2O

50ml

  4°C存放备用

5DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)
  

0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL

 

Tris

6.05

HCL(36%)

3.15克(约2.7mlHCL

H2O

至                            1000ml

DAB3´3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色

6DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
 DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。 73´3´5´5´-四甲基联苯胺(TMB)溶液配制:
 用二甲基甲酰胺(dimethylformamideDMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用。使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。 

81%离子琼脂胶配制液
    作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
   0.05UpH8.6巴比妥钠-HCL缓冲液  

巴比妥钠

23.8

1mol/L HCL

34.5ml

H2O

2150ml


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