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凯氏定氮法

时间：2011/12/23阅读：2081

凯氏定氮法

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

凯氏定氮法是基于待测天然含氮有机物与浓硫酸共热时，会被氧化成为二氧化碳和水，

然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。　　

1. 有机物中的胺根在强热和CuSO₄，浓H₂SO₄ 作用下，硝化生成（NH₄）₂SO₄

反应式为：2NH₂+H₂S04+2H＝（NH₄）₂S0₄ （其中CuSO₄做催化剂）　　

2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中　　

反应式为：（NH₄）₂SO₄+2NaOH＝2NH₃+2H₂O+Na₂SO₄ 　　

2NH₃+4H₃BO₃＝（NH₄）2B₄O₇+5H₂O 　　

3. 用已知浓度的H₂SO₄（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量　　

反应式为：（NH₄）2B₄O₇+H₂SO₄+5H₂O＝（NH₄）₂SO₄+4H₃BO₃ 　　

（NH₄）₂B₄O₇+2HCl+5H₂O＝2NH₄Cl+4H₃BO₃

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