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荧光显微镜的汞灯校准要注意什么

阅读:1602      发布时间:2021-11-28
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  荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜是基于荧光成像进行光度分析的光学测量仪器,广泛用于生命科学研究和临床实验室诊断等领域。
  荧光显微镜的校准
  荧光显微镜比普通显微镜复杂,使用也比较麻烦,但只要注意下面几点,用户自行作些校准还是很容易的。
  1、汞灯的校准
  基于荧光显微镜的原理,决定了选用汞灯作为其光源。由于标本产生的荧光比较弱,为了得到较亮的图像,汞灯的校准至关重要。具体校准步骤如下:
  ①开启汞灯后,在荧光显微镜工作台上放一张白纸,并从物镜转换器中转出物镜,即转换器上出现的空孔位于光轴上,卸去转换器上保护盖(如无空孔,可卸掉一个低倍物镜,校准完毕后再旋上)。转动荧光显微镜主体内的滤光片座,选一个透过绿光的滤光片组,使反射照明有光通过物镜转换器孔,此时在白纸上可以看到汞灯照亮的光斑。如光斑太亮,可以插入中性滤光片,或带上太阳眼镜,以保护眼睛。
  ②转动聚光镜调焦旋手,使汞灯光弧在白纸上成像清晰。因汞灯室内装有一个球面反光镜,用来增加亮度,于是在白纸上看到两个光弧的像。旋转汞灯调节旋手和反光镜位置调节旋手,使两个光弧并立。再转动反光镜聚焦调节旋手,使两个光弧有接近相等的亮度。
  ③旋转汞灯调节旋手和反光镜位置调节旋手,使两个光弧重合。再调节聚光镜调焦旋手,得到放大和均匀的光弧像。这样汞灯校准工作就完成了。转入物镜后,根据物镜具体倍率,稍微调节一下聚光镜调焦旋手就可以了。

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