BH1400 D283 Med+LUC 人脑髓母细胞瘤细胞

D283 Med+LUC 人脑髓母细胞瘤细胞

细胞特性

种属 : 人源（ Homo sapiens ）

组织来源 : 脑 / 小脑（ Brain/cerebellum ）

疾病 : 髓母细胞瘤（ Medulloblastoma ）

年龄 : 6 岁（ 6 years ）

性别 : 男（ Male ）

细胞类型 : 表皮细胞（ Epithelial ）

生长特性 : 贴壁和悬浮生长（ Adherent and suspension4 ）

含量： >1x10^6 细胞数

规格： T25 瓶或者 1mL 冻存管包装

用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（ 1 ） 1mL 冻存管包装干冰运输，收到后 -80 度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（ 2 ） T25 瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1 ）收到细胞后， 75% 酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37 ℃培养箱放置约 2-3h ，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2 ）请在 4 或 5X 显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（ 10 ×， 20 ×）各 2-3 张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3 ）贴壁细胞：细胞在 37 ℃培养箱中放置 2-3h ，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在 60% 以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中） , 加入新配制的专用培养基 6-8mL ，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达 70%-80% 以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4 ）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的专用培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 T25 培养瓶 1 ： 2 传代 。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1 ）  MEM+10%FBS+1%P/S
2 ） 培养条件： 气相：空气， 95% ；二氧化碳， 5% 。 温度： 37 摄氏度，培养箱湿度为 70%-80% 。

3 ） 冻存液： 90% 血清， 10%DMSO ，现用现配。

二． 细胞处理：

1 ） 冻存细胞的复苏：

将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37 ℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含 4-6mL专用 培养基的离心管中混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 3-5min ，弃去上清液，专用培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含 6-8ml专用 培养基的培养瓶（或皿）中 37 ℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2 ） 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90% ，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加入 0.25 ％（ w / v ）胰蛋白酶 -0.53 mM EDTA 于培养瓶中（ T25 瓶 1-2mL ， T75 瓶 2-3mL ），置于 37 ℃培养箱中消化 1-2 分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入 3-4ml 含 10%FBS 的培养基来终止消化。

3. 轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 3-5min ，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。将细胞悬液按 1 ： 2 的比例分到新 T25 瓶中，添加 6-8ml 按照说明书要求配置的新的专用培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按 1:2~1:5 的比例进行。

3 ）细胞冻存 : 收到细胞后建议在培养前 3 代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

上海语纯生物科技有限公司，是由具有优良生命科学、生物技术背景人员共同创办的技术企业。公司专注于原代细胞、肿瘤细胞及细胞培养相关试剂产品，为高校、食品、医药、生物研究等领域提供相关技术支持和服务。

公司自成立以来通过不断地科技创新，产品研发，已为客户提供定制化细胞产品以及完整的细胞培养解决方案，通过积极地探索、研发、深化和丰富产品，目前基础培养基产品种类多达200多种，细胞系300多种，原代细胞接近600种。我们始终以“发展科学技术，关爱公众生命健康”为动力，通过技术创新，广泛吸纳高科技人才，不断完善产品体系、丰富产品链，积极拓展市场，扩充应用领域，，建立了具有市场竞争力的“语纯”品牌。

注意事项

1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩操作；

2、为保持本产品的优良使用效果，请务必按照建议的储存条件进行保存；

3、本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。

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