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色谱柱常见问题（七）
2020年07月20日 08:46:43
来源：化工仪器网 点击量：8589
会使用色谱仪，不代表对了解色谱仪，尤其是色谱仪的各种配件。色谱柱作为色谱系统的心脏，越了解它，就能更好的掌握色谱仪。
【化工仪器网 技术指导】会使用色谱仪，不代表对了解色谱仪，尤其是色谱仪的各种配件。色谱柱作为色谱系统的心脏，越了解它，就能更好的掌握色谱仪。
1、柱子才用了四个月出现峰形拖尾现象，是什么原因？
用了四个月峰形拖尾是很正常的，需要维护清洗一下色谱柱，清除引起拖尾的柱头污染。如果柱头塌陷，可以从其它废柱子里取点填料填补塌陷，但效果不一定好。
2、流动相里有酸，单纯用乙腈冲洗能把酸冲洗干净吗？
流动相里有酸，应该先用纯水或80：20的水/乙腈溶剂冲洗。如果一直在酸性环境，固定相容易流失，造成保留时间前移和其它色谱性能下降。
3、C18和RP18有什么区别，在检测三聚氰胺时为什么结果响应值不同？
RP18就是C18。不过C18柱之间也有区别，测定三聚氰胺一般要用极性比较大的水性C18柱。
4、磺化交联的苯乙烯-二乙烯基共聚物为填充剂的色谱柱没有储存冰箱中，发霉后可以将此色谱柱修复好吗？
聚合物柱子因为不怕酸碱，就直接用强酸强碱清洗。如果是H型，用1M硫酸冲洗；如果是Ca型，可以先用1M硫酸冲洗，再用EDTA钙盐转换回Ca型柱；如果是中性的聚合物反相柱，直接用1M的NaOH冲洗。
5、柱子的柱效影响大吗？一般柱子的柱效规定是多少？
柱效是柱子性能好坏的一个重要体现指标。柱效会影响分离度，当然是峰形越尖锐，柱效越高，和其它峰越容易分开。另外柱效高峰形尖锐，对峰面积的积分误差就小，甚至可以用峰高来定量。一般C18柱，在测定甲苯等不易拖尾的小分子中性不电离物质时，5um的填料，每米的柱效能达到80000以上的塔板数，就算合格。在实际分析物的测定时，一般药典有规定低柱效是2000-3000，新柱子的柱效都高于这个数。
6、流动相中加入四氢呋喃对柱子有损害吗?
四氢呋喃(THF)是反相色谱中洗脱能力极强的溶剂。在流动相中加入THF能改善某些难分离的物质对的分离度，但THF不稳定，容易降解生成具有很强反应活性的过氧化物，能与分析物反应生成新化合物，导致拖尾、峰分裂和鬼峰产生。
THF对柱子有损伤这点是无疑的，但这种损伤是随时间累积的。THF放得越久，产生的过氧化物含量越大，因此应该避免使用生产很久的THF溶剂，而且好将THF冷藏、干燥和避光保存，使用前检测一下过氧化物的含量。
7、哪些原因会造成色谱峰变宽、峰高变低？
如果其它色谱条件没有改变，柱效下降是导致峰变宽的主要原因。对于易电离的极性物质，如果流动相pH选择不合适，分析物既有中性分子态存在，又有离子态存在，峰也会变宽变矮。色谱柱使用后柱效逐步下降是正常现象，如突然降低则属异常，多半是因为使用不当，造成填料特性或柱床结构改变所致。
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